流感病毒現形記

目前，北京市已經進入季節性流感等呼吸道傳染病的高發季節。特別是進入12月份以來，醫療機構報告的兒童病例數上升幅度較為明顯，疫情大部分出現在小學一、二年級和幼兒園。

醫療機構報告流感樣病例

如果一個患者得了感冒后到醫療機構就診，醫生會根據患者的癥狀來初步判斷是不是屬于流感。但確定患者罹患的到底是不是流感，就需要采集咽拭子，然后進行核酸檢測。這個讓流感病毒“現形”的過程由北京市疾控中心、各區疾控中心和部分醫療機構組成北京傳染病監測網絡實驗室來完成。一旦遇到疫情，疾控的實驗室還要在規定時間內采集標本，完成病毒核酸檢測。

北京市疾控中心傳染病地方病控制所副所長楊鵬介紹，目前該所已經建立起覆蓋全市一級以上醫院的傳染病關聯性病例監測系統、流感樣病例監測系統和腸道門診早期預警監測系統，并在傳染病早期預警監測模型研究方面居國內領先地位。以冬季常見的流感為例，現在全市421家一級以上醫療機構每天都會實時上報流感樣病例的例數。楊鵬介紹，醫療機構上報流感樣病例主要以癥狀判斷為主，這些數據是流感疫情的預警、預測的重要依據。不過，癥狀上判斷屬于流感樣病例的患者，到底罹患的是普通感冒還是流行性感冒；如果罹患的是流感，到底是哪種型別的病毒導致的，就需要通過實驗得到答案。本周，記者走進北京市疾控中心的實驗室，在這里見證了一個流感患者的咽拭子標本的檢測過程。

標本乘專用電梯進實驗室

星期二上午，一批來自北京某醫院的疑似流感患兒的咽拭子標本被送到了北京市疾控中心。這一批標本一共10份，全部是前一天剛剛采集的。咽拭子標本聽起來很神秘，不過看起來一點都不神秘：一個十多厘米長的塑料管中泡著一根幾厘米長的棉棒。“采集咽拭子時，工作人員會用壓舌板壓一下患兒的舌頭，隨著孩子發出一聲‘啊’，棉棒在喉嚨里轉一圈，采集過程就完成了。”棉棒會被放入管子里，里面的液體是“病毒保存液”。

采集好的咽拭子標本會被放在小冰箱內暫時保存。北京市疾控中心傳染病地方病控制所主任技師石偉先介紹，病毒對溫度很敏感，采集好的咽拭子標本24小時之內需要在4攝氏度的環境中保存；超過24小時后，咽拭子標本必須放在零下70攝氏度的環境中保存。“常規的家用冰箱冷凍層溫度一般在零下18攝氏度，在零下20攝氏度左右的條件下，24小時后一部分病毒就會死掉；放在零下70攝氏度的環境中，即使放置一個月，死亡的病毒量也很少，這樣能保證存活的病毒足夠進行實驗。”

這批標本一共有10支。采集后24小時之內，它們被送到了市疾控中心的“收樣室”，并且有了自己的“受理編號”。當然遇到一些傳染性很強的病毒，比如SARS病毒、H5N1、H7N9禽流感病毒等，收樣過程就會簡化——直接送到實驗室工作人員手中。

收樣室的工作人員給這批流感咽拭子標本編號后，它們“坐”著專門的物流電梯，來到了市疾控中心實驗室的呼吸道組。在這里，技術人員將進行兩次檢測：一次是核酸檢測，目的是為了明確咽拭子中有沒有流感病毒，如果有，到底是哪一種流感病毒；第二次是進行病毒培養，通過對流感病毒敏感的細胞或雞胚來培養病毒，獲得純化的病毒毒株，這些毒株會成為研究病毒各種特性的重要材料，比如進行抗原性變化的檢測，可以為次年的流感疫苗病毒毒株選擇提供實驗室依據。

石偉先說，目前全市的18家網絡實驗室承擔了大部分檢測任務。北京市疾控中心除了進行部分新采集標本的檢測、對一些難以判定的標本進行復核檢測外，更重要的是對各區疾控中心的監測標本進行質量控制，從而保證全市的標本檢測能夠保持在同一水準。

3小時讓乙型流感病毒現形

標本被送到了實驗室，很快，實驗開始了。

這批標本拆包后放在架子上立好，靜置之后，放到機器開始震蕩15秒，“這個過程是保證棉棒上采集的標本能夠充分溶解在病毒保存液中。”核對標本上的編號后，這些標本就被送進了病毒實驗四室，這里主要完成第二類和第三類呼吸道病毒的提取工作。流感病毒標本檢測中，最“危險”的環節是標本管開蓋的過程，“這個過程都在生物安全柜中完成。”生物安全柜是一個負壓柜，“這樣就能保證流感病毒不會擴散到生物柜以外的空間中。”打開蓋子，先要對標本進行分裝，就是將大采樣管中的病毒保存液平均分到3個2毫升的凍存管里，一個用于核酸檢測，一個用于病毒分離培養檢測，一個留作復核。用于核酸檢測的病毒保存液其實只要200微升左右，經過多次過濾，在各種化學試劑的幫助下，包裹在病毒外面的外衣被“撕開”，病毒露出了被包在核心的核酸，這些核酸最后被收集起來的體積只剩60微升了，這就是核酸提取。

完成核酸檢測的提取步驟之后，很快病毒核酸就要被送到機器上進行檢測。石偉先說，目前流感常見的病毒主要是四種，分別是甲型H1N1病毒、甲型H3N2病毒以及兩種乙型病毒。制備好的病毒融在反應液中，被滴到一個個檢測孔中。“檢測用量以微升為單位。”石偉先需要用加樣槍來操作。她告訴記者，由于每次加注的液體量太少，稍有差池就會影響檢測結果，因此，操作時都是二人組合，“一個人加液，一個人監督，保證不出現錯誤。”

加入病毒核酸的檢測板被送到機器上進行檢測。2個小時后，檢測結果會顯示出來。“你看，如果顯示的數據是一條直線，說明標本是陰性的，也就是這個標本沒有這種流感病毒；如果顯示的數據是一條光滑的S形曲線，證明這種流感病毒是陽性的，可以分析出到底患者感染了哪種流感病毒。”

歷時3個小時，標本中的流感病毒已經徹底現形——原來是一種乙型流感病毒。石偉先說，檢測病毒核酸除了可以確定病毒的種類外，還可以檢測到病毒的基因序列是否發生變化等。而在另外一間實驗室里進行的是針對分離到病毒毒株的抗原性檢測，可以判斷出病毒在人群中的抗原性是否發生變化。如果人群中抗原性發生了較大變化，說明病毒已經徹底發生了變異，在第二年的流感疫苗制備中，需要重新推薦毒株，從而讓疫苗更好地發揮預防作用。

本報記者賈曉宏

甘南攝